分子所處的環(huán)境,如溫度、溶劑、pH值等都會影響分子結(jié)構(gòu)和立體構(gòu)像,從而影響熒光強度。
1.溫度: 一般來說, 大多數(shù)熒光物質(zhì)的溶液隨著溫度的降低,熒光效率和熒光強度將增加,相反,溫度升高熒光效率將下降。
2.溶劑: 同一種熒光物質(zhì)溶于不同的溶劑,其熒光光譜的位置和強度可能會明顯的不同。一般情況下,隨著溶劑的極性增加,熒光強度將增強。
3.pH:溶劑pH值的影響,當(dāng)熒光物質(zhì)是弱酸或弱堿時,溶劑pH值對熒光強度有較大的影響。
4.猝滅劑的影響:熒光猝滅是指熒光物質(zhì)與溶劑或其他溶質(zhì)分子相互作用,引起熒光強度降低、消失或熒光強度與濃度不呈線性關(guān)系的現(xiàn)象。引起熒光猝滅的物質(zhì)稱為猝滅劑。 熒光定量分析條件應(yīng)選擇線性范圍:當(dāng)熒光物質(zhì)溶液的吸光度A≤0.05時,熒光強度與濃度才呈線性關(guān)系。選擇 合適的激發(fā)光和熒光波長:一般選擇 激發(fā)光譜中能產(chǎn)生熒光的入射光波長作為激發(fā)光,熒光光譜選擇熒光的波長作為熒光測定的波長。原子吸收、原子發(fā)射技術(shù)